Invitrogen转染试剂 —— 确保DNA,siRNA, RNA 及寡核苷酸成功转染的工具 →转染效率高 – 能够实现包括难转染细胞等在内的各种类型细胞的高效转染
→毒性低 – 有效排除转染试剂的干扰,准确观察转染后的结果
→减少优化步骤 – 针对大多数细胞系提供快速简单的转染方案
Invitrogen 转染试剂可以成功实现各种细胞的高效转染,包括贴壁细胞、悬浮细胞、昆虫及原代细胞。这些试剂可以适用于包括基础研究和药物开发在内的多方面应用(表1a表1b)。
让转染变得更为简单和方便Invitrogen 的转染试剂通常配套简单的转染方案,因此您可以将时间花费在如何更快的获得结果,而不是优化转染条件。仅需将转染试剂与siRNA 或DNA混合,然后加入细胞中(有无血清均可),就完成了转染实验,不需要洗涤或是更换培养基。转染试剂产品附有针对常见的细胞系已经过完全优化的操作步骤包括细胞,转染试剂和DNA的用量。
表1a – 根据细胞类型和核酸的种类选择不同的转染试剂
表1b – 为您的实验选择合适的转染试剂
细胞类型
需导入核酸的类型
DNA Plasmids
Vectors For RNAi
SiRNA or stealthTM RNAi
标准及常见细胞
Lipofectamine 2000 Transfection Reagent
1.5ml (Cat.no.11668-019)
0.75ml (Cat.no.11668-027)
Lipofectamine RNAiMax
Transfection Reagent
1.5ml (Cat.no.13778-150)
0.75ml (Cat.no.13778-075)
难转染细胞
(包括原代细胞)
Lipofectamine LTX Transfection Reagent
1.0ml (Cat.no.15338-100)
PLUS Reagent
0.85ml (Cat.no.11514-015)
转染试剂敏感的细胞
LipofectamineTM 2000——细胞转染成功的保证LipofectamineTM 2000转染试剂针对最广泛的细胞系提供最高的转染效率和蛋白表达量的选择(表2),在几乎所有的细胞系中您都可以获得较高的转染效率,甚至对于一些难转染的细胞,包括原代神经细胞和胚胎干细胞,这意味着您可以根据自己的需要而不是转染试剂来选择适合实验的细胞系。
LipofectamineTM 2000——高通量转染和建立稳定细胞系的最佳选择LipofectamineTM 2000转染试剂操作简单,高效转染的特点为其高通量的应用提供了良好的保证,并可以很容易的实现自动化和机器人系统中高通量的反应体系的建立。针对多孔板培养的细胞,可以同时进行细胞接种和转染,与传统的转染方法相比,可以节约24小时;另外由于LipofectamineTM 2000转染试剂优异的性能而获得高性噪比,非常适合细胞分析实验。
LipofectamineTM 2000同样可以适用于稳定细胞系的建立。适用LipofectamineTM 2000您可以得到高频率的整合,从而为获得多个稳定克隆提供了保证。这些特点可以帮助您容易的获得在细胞生长状态及蛋白质表达等特性方面都完全满足实验需要的细胞系,为下游的蛋白质大规模的表达,长期的功能研究及转基因生物的发展奠定了良好的基础。
LipofectamineTM LTX 转染试剂——实现基因表达和细胞活性的最大化LipofectamineTM LTX 转染试剂的特点:高转染效率和高蛋白质表达量,并对于大多的细胞类型的毒性都是最低的,这就意味着在获得高转染效率和蛋白质的大量表达的同时,不需要担心转染后细胞的活性。
LipofectamineTM LTX ——实现难转染的细胞和原代细胞的成功转染 除了可以转染广泛的细胞系外,C73733配套PLUS 试剂联合使用,可以完成难转染的细胞和原代细胞的成功转染,包括人类脐带动脉细胞(HUVEC)、RAW267.3 巨噬细胞、神经元细胞及人类间充质干细胞。因此LipofectamineTM LTX转染试剂配套PLUS试剂可以为您的所有瞬时和稳定转染实验,提供功能最强大的捷径。
FreeStyleTM MAX转染试剂 —— 哺乳动物悬浮细胞蛋白质高水平表达的保证新的FreeStyleTM MAX 转染试剂使用的是专利的阳离子脂质体技术,可以确保在哺乳动物悬浮细胞中快速的表达毫克级别的蛋白。结合针对悬浮细胞优化的瞬时转染方法,获得毫克级别的蛋白质从原来的数月缩短到1周。另外,Invitrogen提供优化好的针对CHO细胞瞬时转染方法,您可以生产经过糖基化修饰的蛋白,来满足众多诊断及治疗方面的应用。另外,此法易于放大,适用于多种蛋白质的表达。
(Invitrogen 提供经过优化的完整的FreeStyleTM MAX 表达系统,包括FreeStyleTM MAX转染试剂,FreeStyleTM 表达培养基,FreeStyleTM CHO-S细胞和FreeStyleTM 293细胞。FreeStyleTM MAX转染试剂可以购买作为这个系统的一部分或单独购买。)
RNAi 和LipofectamineTM 2000转染试剂—— 适于shRNA 和miR RNAi 载体,及质粒和siRNA 的共转染RNA干扰技术(RNAi)是药物靶点筛选和验证以及生物研究领域的重大技术创新。使用RNAi技术,能使基因表达沉默或敲除,可以更好的研究疾病相关基因的功能。而高效的转染是能否成功进行基因敲除的关键的第一步。LipofectamineTM 2000转染试剂可以转染各种RNAi,包括shRNA 和miR RNAi 载体,并适用于SiRNA,Steath RNAi 及Dicer 切割产生的SiRNA 库,也能用于SiRNA 和载体的共转染。
RNAi 和Lipofectamine RNAi MAX转染试剂 —— 在低SiRNA浓度下保证基因干扰的高效性LipofectamineTM RNAMAX转染试剂可以高效地将siRNA导入细胞。没有任何一种SiRNA特意的转染试剂可以对如此广泛的细胞类型确保如此简单有效的转染。尽管LipofectamineTM RNAiMAX的说明书建议10nM siRNA 作为优化干扰效果的起始浓度,但是仅用1nM siRNA 就可以获得较高的靶基因干扰效果。
LipofectamineTM RNAMAX 转染试剂可以在10倍用量范围浓度内获得最大的干扰效果并保持良好的细胞活性,这个特点使LipofectamineTM RNAMAX转染试剂的条件非常容易优化并容易在每次实验中获得很好的结果。一般来说,转染试剂带来的细胞毒性可以使真正的目的基因具有的显型被遮盖,因此降低转染试剂的量是RNA干扰实验成功的关键因素。
由于LipofectamineTM RNAMAX转染试剂可以转染多种细胞系,结合Block-iTTM Alexa Fluor红色荧光对照,可以完成多种基因干扰实验(表2)。
表2:对于多种细胞类型使用LipofectamineTM RNAMAX转染试剂都可以获得较高的转染结果
转染试剂
应用及细胞类型
LipofectamineTM LTX 转染试剂
将质粒转染到已知的敏感细胞系或是更多的细胞系,包括原代细胞或是疾病相关的细胞
LipofectamineTM 2000转染试剂
可将质粒DNA 和siRNA 转染到大多数的贴壁或是悬浮细胞系
LipofectamineTM 2000化学成分转染试剂
无动物来源的转染试剂,可以将质粒DNA 和siRNA 转染到大多数的贴壁或悬浮细胞系
LipofectamineTM RNAiMAX转染试剂
将传统的siRNA 或StealthTM siRNA 转染到对转染试剂毒性敏感的细胞系
FreeStyleTM MAX 转染试剂
无动物来源的转染试剂,用于瞬时转染悬浮的HEK 293 细胞或是CHO细胞
LipofectamineTM 2000 转染试剂1:转染质粒DNA或RNAi使用最多的转染试剂
2:适用于常规细胞类型,可以获得高的表达量
3:适用于常规应用包括共转染表达载体和RNai
4:针对多种细胞系提供已经优化的转染步骤
LipofectamineTM LTX转染试剂1:转染原代细胞和难转染等细胞类型,可以得到高表达量
2:适用于对转染试剂敏感的细胞系
3:和PLUS试剂配合使用,可以增加转染效率
LipofectamineTM RNAiMAX转染试剂1:转染siRNA 和StealthTM RNAi 能获得较好的干扰效果
2:可以大大减少由于转染方法导致的脱靶效应.
细胞系/类型
细胞种类
MDA-MB-435
乳腺癌
Hela
宫颈癌
HT1080
人类纤维肉瘤
A549
肺癌
HepG2
肝癌
MCF7
乳腺癌
SK-N-SH
成神经细胞瘤
Mesenchymal Stem Cells
骨髓
HCT116
结肠癌
品名
货号
规格
Lipofectamine2000
适用于绝大多数细胞的绝大多数转染实验
11668-027
11668-019
0.75ml
1.5ml
Lipofectamine LTX + plus试剂
低细胞毒性,针对难转染细胞
15338-100
15338-500
1ml
15ml
Lipofectamine RNAiMAX
将siRNA转染进敏感细胞系
13778-075
13778-150
0.75ml
1.5ml
Cellfectin
用于昆虫细胞的转染
10362-010
1ml
Lipofectamine2000 CD
化学成分明确,排除动物源成分的干扰
12556-014
1ml
FreeStyle MAX
用于瞬时转染293细胞或CHO细胞
16447-100
16447-500
1ml
15ml
Oligofectamine
早期经典的转染产品
12252-011
1ml
Plus 试剂
提高转染效率的辅助试剂
11514-015
0.85ml
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